荧光定量PCR核心试剂盒
Taq酶(荧光定量PCR专用)
荧光定量PCR全攻略
标准品克隆
引物合成常问的几个问题
普通合成 引物合成订单下载
数 量 |
单价(元 /base ) |
时 间 |
备 注 |
2OD |
2.00 |
3个工作日 |
以上报价仅限于 <40 mer的 |
5OD |
3.00 |
10OD |
4.00 |
30OD |
12.00 |
100OD |
40.00 |
长链合成
长 度 |
单价(元 /base) |
数 量 |
时 间 |
40~59 mer |
3.00 |
1-2 OD |
5个工作日 |
60~79 mer |
4.00 |
80~99 mer |
6.00 |
硫代修饰( S-oligo反义寡核苷酸:反义寡核苷酸能与特异mRNA的特定序列相杂交,在转录和翻译水平阻断某些异常的基因的表达,以阻断癌细胞内的异常信号传导,使癌细胞进入正常分化轨道或引起细胞凋亡,从而达到基因治疗的效果。 )
5 OD |
10 OD |
30 OD |
100 OD |
5个工作日 |
15元/base |
20 元/base |
30元/base |
90 元/base |
引物修饰
名 称 |
|
5' -Amino Linker C6 |
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5' -Amino Linker C12 |
|
5' -Phosphorylation |
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5' -Biotin |
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5' -FAM |
|
5' -dig |
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3' -Amino Linker C6 |
|
3' -Phosphorylation |
|
3' -Biotin |
|
3'-FAM |
|
3'-Fitc(Fish探针) |
|
3'-dig |
|
|
|
备注:地高辛标记(地高辛探针)/FITC标记主要用于原位杂交(Fish探针)。
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引物设计软件
核酸分子杂交技术手册
RNA合成及标记
RNA的合成方法和DNA一样,但和DNA化学合成相比,RNA的化学合成较为困难,原因是碱基之间的偶联效率较低、制品容易分解等,另外RNA合成成本极高,所以RNA合成的价格比DNA的较高。
制品纯度
全部HPLC纯化,纯度大于99%。
制品形态
冻结干燥品,呈白色絮状物。在溶液中即刻溶解,便于使用。
制品价格、交货期
·
一般RNA的合成价格
链长
|
DNA量
|
价格
|
交货期
|
10mer以下
|
2
OD以上
|
1200
元/条
|
7
个工作日
|
11mer~40mer
|
2
OD以上
|
80
元/碱基
|
7 个工作日
|
标记种类
|
合成数量
|
价格
|
交货期
|
5'FITC(FAM)
|
2
OD以上
|
1,500
元
|
15 个工作日 |
5'TAMRA
|
2
OD以上
|
1,500
元
|
15 个工作日
|
5'Biotin
|
2
OD以上
|
1,500
元
|
15 个工作日
|
注:客户可自行设计,本公司也可提供免费设计,但最终由您确认!
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在线设计RNAi
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Tuschl Lab
siRNA质粒载体构建技术服务
RNAi (RNAinterference, RNA干扰)技术,即将与内源 mRNA 编码区同源的小片段(19 -23bp)外源双链 RNA(double s`tranded RNA )导入细胞中,通过一系列细胞内反应引发细胞中相应 mRNA 的降解,从而导致特定基因表达沉默的一种技术。RNAi的作用提供了一种经济、快捷、高效的抑制特异基因表达的技术手段,有助于研究该基因在生物模型系统中的作用,是研究基因功能的重要工具,并且逐步成为病毒性疾病、遗传性疾病以及肿瘤等的基因治疗研究的一种手段。
基本原理示意图
siRNA构建技术服务
本公司提供siRNA 载体的构建服务,siRNA 载体可以在细胞内直接转录出 shRNA ,其干扰效果等同于siRNA ,而且能够解决 siRNA干扰时间短的缺点。您只需提供需干扰基因的详细信息,包括基因的 mRNA 序列,Genbank Accession No. 和所属物种,本公司负责设计3条针对目的mRNA的siRNA 靶序列,在短时间内构建三个可用于目的mRNA干扰实验的siRNA 载体。可以为您节省大量的时间与精力。此方法是多种siRNA制备方法中唯一可以进行长期基因沉默研究的方法。
闪晶生物siRNA载体构建服务程序:
1. siRNA表达载体的选用:
本公司选用的siRNA 表达载体含新霉素抗性基因和GFP绿色萤光标记,可以建立稳定表达系,同时可以实时监测载体在细胞中的转染效率。载体中还含有Amp抗性基因,可以无限扩增。
2. 设计siRNA靶序列
A 、根据目的mRNA序列,设计3条RNA干扰靶序列,靶序列一般为19 - 21nt 长。
B 、对于每条选定的siRNA 靶序列,设计 siRNA 正义链和反义链,以 loop(9nt) 相连,称为 shRNA(short hairpin RNA)。
C、阴性对照的设立
3. 合成模板:
合成每条编码 shRNA的DNA 模板的两条单链,退火 DNA 单链得到 shRNA 的 DNA 双链模板。模板链后面接有RNA PolyIII聚合酶转录中止位点,同时两端分别设计 BamHI 和 HindIII 酶切位点,可以克隆到 siRNA 载体多克隆位点的 BamHI 和 HindIII 酶切位点之间。
4. siRNA 空载体用BamHI和HindIII双酶切后,1 %琼脂糖凝胶电泳,回收线性载体。
5. 连接与转化:
把退火的DNA模板双链连接到线性载体中。采用T4连接酶,插入片断与载体的摩尔比约为 3 : 1 。连接产物转化DH5α大肠杆菌,在LB Amp培养基上涂板,37 ℃培养过夜。
6. PCR 鉴定
7. 测序鉴定
8.柱抽提阳性克隆载体并定量。
收费标准
个数 |
价格(¥) |
时间 |
1-3个siRNA表达载体构建 |
1800.00/个 |
14个工作日 |
4-10个siRNA表达载体构建 |
1500.00/个 |
20个工作日 |
10个以上 |
协商 |
协商 |
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